前面提到了柱型號(hào)，不同型號(hào)的色譜柱壽命當(dāng)然也不一樣，跟前面說(shuō)到的C18類似的，CN柱、苯基柱等鍵合硅膠柱都具有較長(zhǎng)的使用壽命。不過(guò)所有基于硅膠基質(zhì)的色譜柱都有一個(gè)天生的弱點(diǎn)，就是硅膠是能被水溶解的，雖然溶解度很小，但是長(zhǎng)年累月使用，尤其在反相色譜系統(tǒng)中，累加了高鹽、高pH、高柱溫、高比例水相等方法參數(shù)后，硅膠的流失尤為明顯。我做過(guò)一個(gè)項(xiàng)目，流動(dòng)相含鹽，柱溫高達(dá)50度，基本上一根色譜柱半年就報(bào)廢了。不過(guò)，是有一種方法可以解決這個(gè)問(wèn)題的，就是在色譜柱前加一個(gè)柱芯與色譜柱類型相同的預(yù)柱，也叫保護(hù)柱，當(dāng)流動(dòng)相里溶解預(yù)柱里的硅膠飽和以后，就不再侵蝕色譜柱的硅膠，從而大大延長(zhǎng)色譜柱壽命。不過(guò)不到萬(wàn)不得已還是不要使用特別苛刻的流動(dòng)相，要知道預(yù)柱的柱芯也是很貴的，那就是一根較短的色譜柱啊，就算保住了色譜柱，經(jīng)常換柱芯也是吃不消的。

 

　　還有一類柱子，就是手性分離柱，這在醫(yī)藥行業(yè)是很大的一個(gè)應(yīng)用。通常手性色譜柱是正相柱，這就要求我們?cè)谑褂檬中灾耙劝严到y(tǒng)置換干凈，再接上柱子用流動(dòng)相沖洗平衡進(jìn)樣。通常是甲醇、異丙醇、正已烷+異丙醇、流動(dòng)相這樣的順序，如果忘記這個(gè)過(guò)程，會(huì)造成很大的麻煩。而且有一些手性柱是涂敷柱，例如淀粉、纖維素等大分子涂敷柱非常怕水，如果系統(tǒng)中原來(lái)的反相流動(dòng)相沒(méi)有置換干凈，就會(huì)對(duì)色譜柱造成不可逆損傷，甚至報(bào)廢。近年來(lái)，科學(xué)家也開(kāi)發(fā)出了鍵合的手性柱，相比較要穩(wěn)定的多，甚至也可以應(yīng)用反相色譜系統(tǒng)。

 

　　使用后對(duì)色譜柱的沖洗保存也比較重要，使用了緩沖系統(tǒng)的尤其要注意。這里推薦一個(gè)反相色譜系統(tǒng)的通用沖洗流程：將所有通道置換成含有較低有機(jī)相比例的水相中，比如10-30%乙腈或甲醇，然后沖洗1個(gè)小時(shí)，然后再梯度增加有機(jī)相比例，各沖洗一定時(shí)間，終保留在高有機(jī)相比例的沖洗液里。低有機(jī)相比例的沖洗液是為了盡可能地沖洗緩沖鹽。通常低壓梯度洗脫的液相色譜儀采用的是四元泵，就是單泵四通道，比例閥混合。這種混合方式有個(gè)弊端，就是混合效果差，因?yàn)楦魍ǖ啦煌壤峭ㄟ^(guò)開(kāi)關(guān)各通道閥的時(shí)間來(lái)控制的。打比方乙腈：緩沖鹽=50：50，如果流速是1.0mL/min，并不是說(shuō)乙腈和緩沖鹽以各0.5mL/min的流速來(lái)混合；而是流速一直是1.0mL/min，但是在往復(fù)泵一個(gè)來(lái)回的時(shí)間內(nèi)，兩個(gè)通道分別打開(kāi)一半的時(shí)間，也就是說(shuō)系統(tǒng)管道里是一段乙腈、一段緩沖鹽。這樣就會(huì)造成鹽的析出。所以，往往是兩通道混合，就算沒(méi)有用緩沖鹽，還是建議先按比例混合好了，然后走單通道，否則的話一樣會(huì)造成鹽析出，或者基線波動(dòng)。走梯度洗脫的話，往往會(huì)把有機(jī)相通道（B）中加入一定比例的水，或者把水相通道（A）配成梯度洗脫的初始比例，把有機(jī)相通道（B）配成梯度洗脫終的比例。